ہائبرڈوما سیل کی توسیع اور سب کلوننگ میڈیم 杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

产品信息 مصنوعات کی تفصیل

产品名称

پروڈکٹ کا نام

杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

ہائبرڈوما سیل کی توسیع اور سبکلوننگ میڈیم

货号 بلی نمبر

BRS{{0}MED02

规格

تفصیلات

500ml/瓶

500 ایم ایل / بوتل

产品组分

اجزاء

DMEM基础培养基:80%(体积比)

DMEM بیس میڈیم: 80% (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

فیٹل بووائن سیرم (FBS، درآمد شدہ): 10% (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

کنڈیشنڈ میڈیم: 10% (v/v)

青霉素: 100 单位/mL

پینسلن: 100 U/mL

链霉素:100 单位/mL

Streptomycin: 100 U/mL

其它添加物:单细胞增殖因子及小分子添加剂

دیگر اضافی چیزیں: واحد-خلیہ کے پھیلاؤ کے عوامل اور چھوٹے مالیکیول سپلیمنٹس

保存条件

ذخیرہ کرنے کے حالات

-20 ڈگری 保存، 有效期 18 个月.

-20 ڈگری پر اسٹور کریں، شیلف لائف 18 ماہ

使用方法

استعمال کے لیے ہدایات

培养基融化:

37 ڈگری 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

注:本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象,静置3-5min使其

沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

درمیانے کو پگھلانا:

میڈیم کو 37 ڈگری پانی کے غسل میں پگھلا دیں۔ بیرونی سطح کو 70% ایتھنول سے صاف کریں اور استعمال کے لیے بائیو سیفٹی کیبنٹ میں رکھیں۔
نوٹ: پگھلنے کے بعد تھوڑی مقدار میں سفید فلوکولینٹ مواد کا ظاہر ہونا معمول کی بات ہے۔ درمیانے درجے کو 3 سے 5 منٹ تک کھڑا رہنے دیں تاکہ فلوکس کو ٹھیک ہو جائے، پھر استعمال کے لیے سپرنٹنٹ کو جمع کریں۔

融合孔处理(状态良好细胞):

针对状态良好的融合孔(比如孔内培养基颜色正常或轻微发黄,且显微镜下细胞状态良好,透亮,大小正常等)可直接使用黄枪头轻轻吹打融合孔,细胞计数后按0.8-1.5cell/孔/200ul培养基铺

فیوژن ویلز کو سنبھالنا - صحت مند خلیات:

اچھی حالت میں خلیات کے ساتھ فیوژن ویلز کے لیے (مثلاً، درمیانے رنگ کے نارمل یا ہلکے پیلے، خوردبین کے نیچے خلیے صحت مند، روشن، اور سائز میں نارمل دکھائی دیتے ہیں)، پیلے پِیٹ کی نوک کے ساتھ آہستہ سے اوپر اور نیچے پپیٹ کریں۔ خلیات اور پلیٹ کو 0.8–1.5 خلیات/اچھی طرح 200 µL میڈیم میں شمار کریں۔

融合孔处理(状态欠佳细胞):

针对状态不太良好的融合孔(比如孔内培养基颜色酸化发黄或显微镜下细胞状态皱缩,发黑等)可选择2种方式进行后续亚克隆.

فیوژن ویلز کو سنبھالنا - سب سے بہترین خلیات:

سب سے بہترین حالت میں خلیات کے ساتھ فیوژن کنوؤں کے لیے (مثلاً، درمیانے تیزابی/پیلے یا خلیے سُرکھے ہوئے، مائیکروسکوپ کے نیچے سیاہ نظر آتے ہیں)، بعد کے ذیلی کلوننگ کے لیے دو اختیارات دستیاب ہیں:

第一种方式是将融合孔细胞吸至装有1ml本培养基的24孔板内،在扩培后的第2-3日再行计数进行亚克隆铺板(0. 8-1.5cell/孔/200ul培养基),此时融合孔细胞倍增的次数有限且细胞状态良好,非培养基

آپشن 1: خلیات کو فیوژن کنویں سے 24 کنویں پلیٹ میں منتقل کریں جس میں اس میڈیم کا 1 ملی لیٹر ہو۔ توسیع کے 2–3 دن کے بعد، خلیات کی گنتی کریں اور 0.8–1.5 خلیات/اچھی طرح 200 μL میڈیم میں سب کلوننگ انجام دیں۔ اس مرحلے پر، سیل کو دگنا کرنا محدود ہے لیکن سیل کی حالت اچھی ہے، جو اسے سب کلوننگ کے لیے مثالی بناتی ہے۔

第2种方式是使用黄枪头小心吸弃融合孔上清,每孔补充200ul新鲜的本培养基,至573 CO2静置培养3-4小时،然后取样细胞计数后进行亚克隆(0.8-1.5cell/孔/200ul培养基);

پیلے رنگ کے پِیٹ ٹِپ کا استعمال کرتے ہوئے فیوژن کنویں سے سپرنٹنٹ کو احتیاط سے ہٹائیں اور فی کنویں میں 200 µL تازہ میڈیم شامل کریں۔ 37 ڈگری، 5% CO₂ پر 3–4 گھنٹے تک انکیوبیٹ کریں۔ پھر، 200 µL میڈیم میں 0.8–1.5 سیلز/اچھی طرح سے سیلز کا نمونہ کریں، گنیں اور سب کلوننگ انجام دیں۔

注:使用本司"杂交瘤扩培及亚克隆专用培养基"培养后的亚克隆一般第6-8日即可开始下游检测筛选.

نوٹ: ہائبرڈوما سیل ایکسپینشن اور سب کلوننگ میڈیم کے ساتھ کلچر کیے گئے ذیلی کلون عام طور پر 6-8 دنوں کے بعد کے ذیلی کلوننگ کے نیچے بہاو اسکریننگ یا تجزیہ کے لیے موزوں مرحلے پر پہنچ جاتے ہیں۔